有的菌落可能是由多个细菌形成的“菌苔”。原则上菌苔长成片状而末分散为单个菌落的平皿，应废弃。

平板划线分离法包括分区划线法和连续划线法。划线接种时，尽可能做到直、密、匀，并有效地利用培养基表面以达到充分分离的目的。如标本含菌较多，可接种在选择培养基上，如标本含菌较少，可采用分区划线法接种，接种环可连续划完各区，中间不需要灭菌。

采集病料后，如不能立即进行检验，应置冰箱中冷藏。病理标本需要浸泡在10%中性福尔马林溶液内。

病料最好在使用抗生素之前采集，新鲜并具有代表性，且应有一定数量。

无论是高压蒸汽灭菌或是无菌分装的培养基，均应做无菌检查，合格后方可使用。

一般细菌繁殖体经煮沸3分钟后即可杀灭，如细菌疑似有芽孢，可在水中加入石炭酸，使成5%溶液，并煮沸30分钟。

高温易使微生物蛋白质发生凝固，这是微生物死亡的直接原因。

蛋白质凝固温度与含水量有关，水分愈多则凝固温度愈低，水分少或无水分的物品，需要提高温度才能使蛋白质发生凝固。

压力蒸汽灭菌法是一种极为可靠的灭菌方法，它能杀死一切微生物。它的特点是杀菌效果可靠，经济、快速、无臭、无味和无毒性，因此是一种安全有效的灭菌方法。

使得吸管吸液时，应将吸管口插入液面下0.5-1cm，要使吸管随液面下降而下降，不要直接插入液体底部吸取，防止管外粘附过多液体。