问答题X 纠错
(1)实验方法:
由于抗肿瘤药物的作用是引起肿瘤细胞的凋亡,用新药A对人肿瘤细胞进行处理后,利用细胞凋亡过程中会被特异性切割,形成大小差别为200bp左右片段的特点,通过琼脂糖凝胶电泳检测其有无特征的核小体断裂形成的梯状条带来鉴定新药A的功效。
(2)实验材料:
人肿瘤细胞、溴化乙锭(EB)、Tris-HCl、NaCl、EDTA、SDS、氯代异戊醇、蛋白酶κ、Tris-平衡酚等。
(3)实验仪器:
水平电泳仪、凝胶成像系统等。
(4)实验过程:
①将人肿瘤细胞放入合适培养基培养。
②将新药A加入培养基中。
③一段时间后从培养基中收集细胞,利用SDS/酚法提取细胞基因组DNA。
④将提取到的DNA进行琼脂糖凝胶电泳。
⑤取电泳完的琼脂糖凝胶用EB进行染色,15min后取出冲洗,在紫外下,利用凝胶成像系统观察DNA电泳情况。
⑥观察实验结果并分析。
(5)预期实验结果及分析:
①若基因组DNA出现典型的相隔200bp的梯状条带,则说明新药A有抗肿瘤功效。
②若基因组DNA无典型的相隔200bp的梯状条带呈现,则说明新药A无抗肿瘤功效。
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