（1）抹片：取洁净载玻片，对于液体菌，可直接用灭菌接种环取一环菌液，于玻片中央均匀涂布成适当大小的薄层。对于平板菌，则先取一滴蒸馏水于玻片中央，再用灭菌接种环取少量菌体，在水滴中混匀，均匀涂布成适当大小的薄层。
（2）干燥：涂好的抹片，应让其自然干燥或在酒精灯火焰上拖过以适当加温（以不烫手为度），促其干燥。
（3）固定：载玻片涂抹面向上，背面在酒精灯火焰上通过数次，感烫手为度。