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填空题

目前,在重组体的筛选中,已经发展了许多构思巧妙、具有极高准确性的筛选方法。 大致可以分为 (1)();(2)();(3)();(4)()。

参考答案:遗传学方法;物理筛选法;核酸杂交法;表达产物分析法

填空题

重组体的筛选有两层涵义,一是将(),二是将()。

参考答案:携带有外源插入DNA片段的克隆挑选出来;携带有特定外源插入片段的重组体挑选出来

问答题

某一质粒载体具有 Tetr和 Kanr的表型,在 Kan抗性基因内有一 Bgl I的切点。现用 Bgl I切割该载体进行基因克隆,问:(1)转化后涂皿时应加什么样的抗生素?(2)培养后长出的菌落具有什么样的抗性基因型?(3)如何利用抗性变化筛选到含有插入片段的重组体?

参考答案:(1)加四环素;(2)TetrKans和TetrKanr;(3)重新点种在含Tet、Kan和只加Tet的平板上,选择只在...

问答题

若在进行 DNA重叠群分析时,你发现在一个编码有价值但不稳定蛋白质的可读框之后,紧接着另一个可读框,它可在蛋白质的 C 末端加上一个稳定结构。举出至少两种获得被修饰蛋白产物的方法。

参考答案:首先,可引入无义 tRNA阻遏物在原有的转录物上造成通读。另外,可以将该 DNA片段克隆到质粒上表达...

问答题

为了大量获得许多用于生化鉴定的产物,你想将拟南芥中的一个序列已知、编码单体酶蛋白的基因在单细胞微生物中表达,你如何确保最终能得到产物?

参考答案:由于基因已被测序并进行了分析,因此前体mRNA结构是已知的。这对了解蛋白质的功能区是十分重要的,可以避免有关多肽翻译后加...

问答题

何谓稀有酶?(举例说明)

参考答案:所谓稀有酶是指那些识别序列在基因组 DNA中不常见的酶,因此它们的切割频率较低。如NotI就是最常用的稀有酶,...

问答题

如何使用甲基化酶对克隆 DNA 进行保护?有什么意义?

参考答案:在构建基因文库时,可用与接头中限制性内切核酸酶相应的甲基化酶对克隆 DNA先进行甲基化修饰,将插入片段上该酶可能的识别序...

问答题

什么是同裂酶?为什么说用同裂酶进行体外重组效率最高?

参考答案:同裂酶是一类识别序列不完全相同,但是产生的黏性末端至少有四个碱基相同的限制性内切核酸酶。用这些限制性内切核酸酶处理载体和...

问答题

几何谓接头连接法(1inker ligation)?

参考答案:将人工合成的或来源于现有质粒的一小段DNA分子(在这一小段DNA分子上有某种限制性内切核酸酶的识别序列),加到载体或外源...

问答题

什么是同聚物加尾连接法(homopolymer tails joining)?用何种方法加尾?具有哪些优缺点?

参考答案:所谓同聚物加尾法就是利用末端转移酶在载体及外源双链 DNA 的 3’端各加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏性末端...
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