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填空题

Clark 发现用 Taq DNA 聚合酶得到的 PCR 反应产物不是平末端,而是有一个突出碱基末端的双链 DNA分子。根据这一发现设计了克隆 PCR 产物的()。

参考答案:T—载体

填空题

引物在基因工程中至少有 4 个方面的用途:(1)()(2)()(3)()(4)()。

参考答案:合成探针;合成cDNA;用于PCR反应;进行序列分析

填空题

用于分离质粒 DNA的细菌培养浓度达到 0.8×10 细胞/ml 时,即可通过离心收集菌体。收集菌体使用定角转子,离心的速度以()为宜。

参考答案:8000r/min

填空题

通常可在三种温度下保存 DNA:4~5℃、-20℃、-70℃,其中以()最好。

参考答案:-70℃

填空题

浓缩 DNA的方法有:(1)()(2)()(3)()(4)()。

参考答案:包埋吸水法;蒸发;膜过滤法;有机溶剂抽提法

填空题

用乙醇沉淀 DNA时,通常要在 DNA溶液中加入单价的阳离子,如 NaCl 和 NaAc,其目的是()。

参考答案:中和DNA分子的负电荷,增加DNA分子间的凝聚力

填空题

在分离 DNA时要使用金属离子螯合剂,如 EDTA和柠檬酸钠等,其目的是()。

参考答案:整合Mg2+离子,抑制核酸酶的活性

填空题

同其他水解蛋白酶相比,蛋白水解酶 K具有两个显著的优点:(1)()(2)()。

参考答案:水解能力很强,作用范围广;在SDS和EDTA中仍保持高活性,可以同SDS和EDTA同时使用

填空题

用酚—氯仿抽提DNA时,通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇。这是因为:异戊醇()。另外,异戊醇有助于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维持稳定。

参考答案:是一种有机试剂,可以降低表面张力,从而减少气泡产生

填空题

酚是蛋白变性剂,用酚抽提细胞 DNA时,具有两方面的作用:(1)()(2)()。

参考答案:使蛋白质变性;由于它能使蛋白质变性,故也能使核小体和核糖体解聚,释放出DNA和RNA,提高DNA的得率
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