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参考答案:

单克隆抗体制备方法:
(1)体外培养法:体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞,从上清液中获取单克隆抗体.一般包括悬浮培养法和固相培养法。
(2)动物体内诱生法,动物体内诱生法是一种操作简便、经济的常用方法,主要用于生产科研或诊断用的单克隆抗体,是一般用途的单克隆抗体制备的首选方法.常用的体内诱生法有实体瘤法、腹水制备法等。
①实体瘤法,对数生长期的杂交瘤细胞按(1-3)x107/ml接种于小鼠背部皮下,每处注射0.2ml,共2-4点,待肿瘤达到一定大小后则可采血,血清中单克隆抗体含量可达到1-10mg/ml,但采血量有限.也可以无菌摘取肿瘤组织,研磨成细胞悬液,然后用淋巴细胞分离洗涤2次,再加入20%的DMEM培养液,置37度、5%CO2孵箱中培养。
②腹水制备法,常规是先腹腔注射0.5ml。降植烷或液状石蜡于BAI.B/C鼠,1-2周后腹腔注射1×106个杂交瘤细胞,接种细胞7-10天后可产生腹水,密切观察动物的健康状况与腹水吸入试管中,一般一只小鼠可获1-10ml腹水。

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