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填空题

DNA聚合酶 I是()在 1965 年从大肠杆菌细胞中分离的,所以又称为()合酶。该酶由大肠杆菌基因()编码,是一种单链球蛋白,分子量为 109kDa,酶蛋白中含有一个 Zn 原子。

参考答案:A.Komberg;Komberg;polyA

填空题

pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于(),它的四环素抗性基因来自于(),它的氨苄青霉素抗性基因来自于()。

参考答案:pMB1;pSCl01;pSF2124(R质粒)

问答题

为了绘制长为 3.0kb BamHⅠ限制性片段的限制性图谱,分别用 EcoRI、HpaⅡ、EcoRI+HpaⅡ消化这一片段的三个样品,然后通过凝胶电泳分离 DNA 片段,溴化乙锭染色后观察 DNA带型(图 15.2)。请根据这些结果,绘制一个限制性图谱,要标明 EcoRI和 HpaⅡ识别位点间的相对位置,以及它们之间的距离(kb)。

参考答案:图 A15.2是 BamHI片段的限制性图谱。倒装法绘图是同样有效的,制作这种图谱的一种方法如下:画一条适当长度的线段表...

问答题

在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind  Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。

 

如果用克隆在另一个与 pBPl完全不同源载体上的四环素抗性基因作为探针进行 Southern 印迹杂交,预测上述电泳图会出现什么样的杂交带?

参考答案:除 No.2 的2.5kb,No.6 的1.5kb 和1.0kb 没有带外,其他都有带。

问答题

在细菌质粒 pBPI的四环素抗性基因 tetR的中间有一个 HindⅡ的切点。用 Hind  Ⅲ切割果蝇基因组 DNA,以 pBPl 为载体构建基因组文库。分子杂交证明克隆 15 带有果蝇的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV对克隆 15 进行了酶切分析,电泳结果如图 15.1(用酶切的 pBPl质粒 DNA作对照),旁边标出了片段的大小。

绘制含有插入片段和不含插入片段时的 pBPl 的限制性图谱,并标明四环素抗性基因的位置;

参考答案:

问答题

计算下列三种酶各自在某染色体 DNA 序列上识别位点间的平均距离:

参考答案:

填空题

DNA连接酶的单位通常用 Weiss 单位表示,一个 Weiss单位是:()。

参考答案:在37℃下20分钟内催化焦磷酸交换1nmol32p到ATP所需要的酶量

填空题

原核生物主要有两种类型的 DNA连接酶:E.coliDNA连接酶和 T4DNA 连接酶。基因工程中使用的主要是 T4DNA连接酶,它是从 T4 噬菌体感染的 E.coli 中分离的种单链多肽酶,分子量为——』Oa,由 T4 噬菌体基因——编码。E.coli DNA连接是由大肠杆菌基因一编码,也是一条多肽链的单体,分子量为()kDa。这两DNA 连接酶有两个重要的差异:第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同,TDNA连接酶用(),而 E.coli DNA连接酶则用()作为能源。第是它们催化平末端连接的能力不同,在正常情况下只有T4DNA连接酶能够连接平末端E.coliDNA连接酶则不能。即使是调整反应条件,E.coli DNA连接酶催化平末端连接效率也只有 T4 DNA连接酶的()。

参考答案:68、30、51、74;ATP;NAD;1/100

填空题

连接酶(ligase)是一类用于核酸分子连接形成()键的核酸合成酶,有DNA连接酶RNA连接酶之分。

参考答案:磷酸二酯

名词解释

限制性物理图谱

参考答案:即限制性内切核酸酶作图(restriction mapping)。简单地说就是 DNA分子中限制性内...
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