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Ⅲ类限制酶有哪些特点？

参考答案：

Ⅲ类酶是基因工程中不常用的酶，分子量和亚基组成类似于 I类酶，作用方式基本同Ⅱ类酶。如 EcoPI是由两个亚基组成，一个亚基(M 亚基)负责位点识别和修饰，另一个亚基(R 亚基)具有核酸酶的活性。切割 DNA时需要 ATP、Mg2+，也能被 SAM激活，但并非必须。

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问答题

I类限制酶具有哪些特点？在基因工程中有什么作用？

参考答案：I类限制性内切核酸酶的分子量较大，一般在 30 万道尔顿以上，通常由三个不同的亚基所组成。例如限制性内切核酸酶 EcoB...
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问答题

细菌的限制—修饰系统有什么意义？

参考答案：不同种的细菌或不同的细菌菌株具有不同的限制酶和修饰酶组成的限制与修饰系统。修饰的本质是通过甲基化酶将DNA中某些碱基进行...
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问答题

什么是细菌的限制—修饰系统？（restriction-modificationsystem，R-Msystem）

参考答案：细菌中有作用于同一DNA的两种酶，即分解 DNA 的限制酶和改变DNA碱基结构使其免遭限制酶分解的修...
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问答题

用 Klenow 酶填补的办法可使 5’黏性末端转变成平末端。这种方法常使 DNA 上的某些限制酶的识别位点消失。请问，对于下列限制酶，用这种方法处理会不会使它们的识别序列都消失？BamH I（G↓GATCC）； Taq I（T↓CGA），BssHⅡ（G↓CGCGC）。

参考答案：用这种方法处理BssHⅡ不会消失。
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问答题

用连接酶将 Sau 3AI（，bGATC）切割的 DNA与经 BamHI（G↓’GATCC）切割的 DNA连接起来后，能够被 BamHI 切割的机率有多大（用百分比表示）？

参考答案：能够被 BamHI 切割的机率有25％。 
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问答题

下面几种序列中你认为哪一个（哪些）最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，  GATATC，ACGGCA？为什么？

参考答案：

（1） GATATC；AAATUF；
（2）因为它们是回文序列。

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问答题

在序列 5’—CGAACATATGGAGT-3’中含有一个 6bp 的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？

参考答案：回文序列是：5’-CATATG-3’。
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问答题

某学生在用 EcoRI切割外源 DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？

参考答案：盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。
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问答题

有些噬菌体和质粒常常编码一些抗限制性酶的蛋白以中和宿主的限制系统。你认为噬菌体和质粒还有哪些可能的方式避免宿主的限制作用？

参考答案：某些噬菌体的基因组中有修饰的碱基，因此对限制性内切核酸酶具有免疫作用。另一种避免限制酶切割的途径是抑制 SAM...
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问答题

Fredrick 和 McClarin等用一个由 13 个碱基对的 DNA片段与 EcoRI、反应，然后分离到酶和 DNA 共结晶的复合物，通过 X射线分析发现了什么？

参考答案：发现：具有活性的 EcoRI是一个二聚体，它们同 DNA结合形成一个直径为 50A 的球形结构，两个 EcoRI位于 ...
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