问答题X 纠错
聚合酶链反应,是一种在体外快速扩增特定基因或DNA序列的的方法,因此也称为基因的体外扩增法。是20世纪80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点。其应用主要是以下几个方面:
(1)科学研究:
基因克隆;DNA测序;分析突变;基因重组与融合;检测基因的修饰;鉴定与调控蛋白质结构的DNA序列;转座子插入位点的绘图;合成基因的构建;构建克隆或表达载体;检测某基因的内切酶多态性等。
(2)临床诊断:
细菌、病毒、螺旋体、支原体、衣原体、立克次氏体、分枝杆菌等病原体的鉴定;人类遗传病的鉴定;诊断遗传疾患;临测临床标本中病原体的核酸序列;对法医学标本做遗传学鉴定;分析激活癌基因中的突变情况;生成克隆化双链DNA中的特异序列作为探针。
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(1)抗生素抗性基因插入失活法;
(2)β一半乳糖苷酶基因失活插入法;
(3)放射性标记核酸探针杂交法。
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(1)具有多克隆位点;
(2)能自我复制;
(3)具有筛选标记;
(4)在细胞内的稳定性。
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