构建cDNA文库的主要步骤：
①mRNA分离；
②cDNA第一链合成；
③cDNA第二链合成
④载体与cDNA的连接；
⑤噬菌体的包装及转染；
⑥cDNA文库的扩增和保存。

（1）抗生素抗性基因插入失活法；
（2）β一半乳糖苷酶基因失活插入法；
（3）放射性标记核酸探针杂交法。

（1）具有多克隆位点；
（2）能自我复制；
（3）具有筛选标记；
（4）在细胞内的稳定性。