革兰染色原理：
⑴通透性说：主要是由于两类细菌的细胞壁成分和结构的不同。革兰阴性菌细胞壁中含有较多类脂质，而肽聚糖含量较少。当用酒精脱色时，溶解了类脂质，增加了细胞的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，细胞脱色，经复染后，染上复染液（复红）的颜色；而革兰阳性菌细胞壁中肽聚糖含量多且交联度大，类脂质含量少，经酒精脱色后，肽聚糖层的孔径变小，通透性降低，酒精不易进入菌体脱色，故细胞仍保留初染液（结晶紫）的颜色。
⑵化学说：G⁺菌菌体含有大量的核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫牢固结合，使已着色的菌体不易脱色。
⑶等电点说：G⁺菌低于G^-菌，G+菌带负电荷比G^-菌要多，G⁺菌易与带正电荷的碱性染料（结晶紫）结合牢固，因而不易脱色。
革兰氏染色的步骤（方法）如下：

结果判断：革兰阳性菌呈紫色，革兰阴性菌呈红色。
革兰染色的临床意义：
⑴鉴别细菌；
⑵选择药物；
⑶与致病性有关。