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参考答案:

(1)遗传体系
①异核现象:菌丝间的接触和融合形成异核体,在同一条菌丝或细胞中含有不同基因型的细胞核。
②接合现象:菌丝间经接触和融合以后,相同细胞质中不同细胞核在两者增殖过程中,发生部分染色体的转移或遗传信息的交换。结果是部分合子形成。
③异核系的形成:当部分合子形成后,就会产生杂合的无性繁殖系,即异核系的细胞核。细胞核是经过一次单交换而产生的异核系染色体组,有一个二体区。过度阶段菌落很小,不稳定。其分生孢子影映在同样的培养基上不能生长 ④重组体的形成:染色体重叠的二体区的不同位置上发生交换(部分合子也可经过双交换形成重组子)---重组体孢子。
(2)杂交方法:混合培养法、玻璃纸法、平板杂交法
①混合培养法:将带有互补的营养缺陷型的两个亲株混合后,接种到丰富培养基上,待孢子形成后制备单孢子悬液并在选择性平板上分离,长出的单菌落即为各种不同类型的重组体
②玻璃纸法:使用本法必具备两个条件:第一,在直接亲本必须具有两个遗传标记,如一个亲本带有一种营养缺陷标记和抗药性标记;另一直接亲本则带有另一营养缺陷型和对同一药物的敏感性;第二,选择性培养基带有抗性药物的补充培养基。筛选方法为,先将两亲本的孢子混合接种在铺有玻璃纸的完全培养基上,培养24h,在显微镜观察下小菌落刚刚接能而未生长气生菌丝,玻璃纸上长出后基内菌丝时,将玻璃纸转移到含有抗生素的基本培养基平板上,这时基内菌丝停止生长(抗性亲本有时缓慢继续生长)、培养2d后,在玻璃纸表面长出的微小的气生菌丝的小菌丛即为异核系,异核系的分离是在解剖显微镜下用无菌细针收集异核系小菌丝,再将异核系小菌丝置于完全培养基平板表面上—滴无菌水中,涂布均匀后培养3d,获得分离子。
③平板杂交法:先将菌株培养在非选择性培养基上,在菌落形成孢子后,用影印法把菌落印至已铺有试验菌孢子的完全培养平板上,再培养至孢子形成,然后将此孢子影印到一系列选择性培养基上,筛选各种重组体子代。

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