（1）供体植株的生长条件。
（2）供体植株的年龄。
（3）花粉发育时期。
（4）花蕾和花药的预处理。
（5）培养基。
（6）培养条件。

①花部和营养体的形态观察；
②细胞学监测；
③生化鉴定；
④分子生物学分析。

（1）用选择性培养基创造条件；
（2）互补形态；
（3）异核体机械分离和核型分析；
（4）体细胞杂种和胞质杂种的鉴别。