问答题X 纠错

试述真空转移法的原理。

参考答案：真空转移法是近年来兴起的又一种简单、迅速、高效的DNA 和RNA印迹法。其原理是利用真空作用将转膜缓冲液从上层容器中通过凝胶抽到下层真空室中，同时带动核酸片段转移到置于凝胶下面的尼龙膜或硝酸纤维素膜上。此法原理与毛细管虹吸法相同，只是以滤膜在下、凝胶在上的方式将其放置在一个真空室上，利用真空作用将转膜缓冲液从上层容器中通过凝胶和滤膜抽到下层真空室中，同时带动核酸片段转移至置于凝胶下面的硝酸纤维素膜或尼龙膜上。
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试述电转法的原理。

参考答案：电转法是利用电场的电泳作用将凝胶中的DNA 转移到固相支持物上。其基本原理是：将滤膜与凝胶贴在一起，并将凝胶与滤膜一起置...
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试述毛细管虹吸印迹法的原理。

参考答案：此法是利用浓盐转移缓冲液的推动作用，将凝胶中的DNA 转移到固相支持物上。其基本原理是：容器中的转移缓冲液含有高浓度的N...
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试述基因组DNA 探针的制备。

参考答案：从基因组文库中筛选得到一个特定基因（或基因片段）的克隆后，大量扩增、纯化，切取插入片段，分离纯化，即可作为探针使用。真核...
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参考答案：cDNA 中由于不存在内含子及其他高度重复序列，因此是一种较为理想的核酸探针。以mRNA 为模板，在逆转录酶催化下，逆转...
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参考答案：将目的基因克隆到带有SP6或T7启动子的质粒中，插入到启动子下游。再用适当的限制酶在插入序列的下游切断质粒使环状质粒DN...
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参考答案：根据已知的核酸序列，采用DNA 合成仪合成一定长度的寡核苷酸片段，亦可作为探针使用。如不知核苷酸顺序，可根据蛋白质的氨基...
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单项选择题

引物3’端最佳碱基选择是：（）。

A.A 和T
B.G 和A
C.G 和C
D.A 和C

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单项选择题

可以采用以下哪种方法，协助诊断是否存在基因的突变或者缺失：（）。

A.原位PCR
B.多重PCR
C.不对称PCR
D.锚定PCR

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多项选择题

以下关于PCR 技术应用，说法正确的是：（）。

A.筑巢PCR 和共享引物PCR 有利于增强PCR 反应的特异性，适用于模板含量极少的样品的检测
B.不对称PCR 可以大量制备单链DNA ，可用于DNA 的序列测定
C.反向PCR 和锚定PCR 适用于3’或5’端未知序列的DNA 片段扩增
D.定量PCR 可用于基因表达和调控的研究

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多项选择题

PCR 反应时，应设立哪种对照：（）。

A.阴性对照
B.阳性对照
C.试剂对照
D.以上答案都正确

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