问答题X 纠错

参考答案:

定义:PCR技术又称聚合酶链式反应(polymerasechainreaction),是通过模拟体内DNA复制的方式,在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。
原理:PCR技术的基本原理PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:
①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
②模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
③引物的延伸:DNA模板与引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍
发展:Khorana于1971年最早提出核酸体外扩增的设想。1985年,美国科学家KaryMullis发明了PCR技术。1988年初,Keohanog通过对所使用的酶的改进,提高了扩增的真实性。Saiki等人又从生活在温泉中的水生嗜热杆菌内提取到一种耐热的DNA聚合酶。此后PCR方法从一种定性的分析方法发展到定量测定;从原先只能扩增几个kb的基因到目前已能扩增长达几十个kb的DNA片段。到目前成为为止,PCR技术已有十几种之多,例如反转录PCR,免疫PCR等。
应用:特定DNA序列的克隆与重组子的鉴定,DNA的体外定点突变与分析,同源重组子的检测,染色体DNA的引物原位杂交,构建基因文库,测序,基因的修饰,基因表达研究—mRNA的定量分析等。
P.CR是一种分子生物学研究的基础技术。在它30多年的发展中衍生出了诸如PCR-RFLP、PCR-SSOP、VN-TR,以及免疫PCR、致突变PCR和定量PCR等十几种不同的技术方法。PCR技术可以为基因工程提供目的基因,并广泛地应用于个体识别、亲子鉴定、免疫配型、疾病诊断等方面。PCR已经渗透到了生命科学的各个领域。

查答案就用赞题库小程序 还有拍照搜题 语音搜题 快来试试吧
无需下载 立即使用

你可能喜欢

问答题

简述细胞质遗传的特点

参考答案:非孟德尔遗传:遗传方式非孟德尔式:杂交后代不表现一定比例的分离。核外遗传:正交和反交的遗传表现不同。母体遗传:通过连续回...

问答题

什么是增强子,简述其作用特点。

参考答案:增强子是能使和它连锁的基因转录频率明显增加的DNA序列。作用特点:1、增强效应十分明显2、增强效应能在很远的距离实现3、...

问答题

简述真核生物mRNA转录后加工的过程

参考答案:M.RNA的加工修饰包括:5’端形成帽子结构、3’端加polyA、剪接除去内含子、甲基化、mRN...

问答题

简述DNA在生物体内的存在形式?

参考答案:1、染色体DNA是生物体遗传信息的主要载体:原核生物染色体:一条染色体,DNA与非组蛋白结合,位于拟核区,DNA是双链闭...

问答题

简述大多数真核启动子受正调控的原因。

参考答案:有两点:1.由于真核基因组比原核大的多,因此调控蛋白在DNA上的非特异性结合比例很高,(真核的RNA聚合酶对启动子只有很...

问答题

蛋白质翻译后加工的主要内容包括哪些?解释分子伴侣。

参考答案:对真核基因所编码的蛋白质而言,翻译后加工的内容包括:(1)除去肽链合成的起始氨基酸或随后几个氨基酸残基;(2)分泌蛋白或...

问答题

真核基因表达调控与原核生物相比有什么异同点?真核细胞基因表达调控有哪些不同层次?

参考答案:真核基因表达调控的许多基本原理与原核生物相同。主要表现在:1、与原核的调控一样,真核基因表达调控也有转录水平调控和转录后...

名词解释

负调控系统

参考答案:也是一种转录水平的调控机制。调节基因编码的调节蛋白是阻遏蛋白,它本身或与辅阻遏物协同结合于操纵基因,可阻遏操纵子结构基因...

名词解释

正调控系统

参考答案:正调控系统是一种转录水平的调控机制。包括可诱导的正控制系统、可阻遏的正控制系统和CRP(CRPpositivecontr...

名词解释

顺式作用组件

参考答案:是指对基因表达有调节活性的DNA序列,其活性只影响与其自身同处在一个DNA分子上的基因;这种DNA序列通常不编码蛋白质,...
赞题库

赞题库-搜题找答案

(已有500万+用户使用)


  • 历年真题

  • 章节练习

  • 每日一练

  • 高频考题

  • 错题收藏

  • 在线模考

  • 提分密卷

  • 模拟试题

无需下载 立即使用

版权所有©考试资料网(ppkao.com)All Rights Reserved