由于目前生产上采用的无菌试验斜面培养基对某些杂菌并不敏感，生长甚慢，或不适于生长。如四叠球菌、八叠球菌、连杆菌及小球菌等。故在种子罐进发酵前，所有种子系统无菌留样都需进行再一次无菌检查，将留样逐个涂片染色镜检以杜绝上述杂菌混入发酵罐。