植物细胞培养首先需要从植物样品制备单细胞。植物单细胞的获得一般有三种方法：机械法、愈伤组织法和酶解法。
①机械法通过机械磨碎、切割等操作获得游离的细胞，效率低，容易对细胞造成损伤。
②酶解法选择专一性水解酶在温和的条件下将植物细胞壁物质降解，从而使细胞彼此分开，这种方法称为酶解法。经常采用的生物酶包括：琼脂酶、果胶酶、蜗牛酶、纤维素酶等。
③愈伤组织法通过培养植物外植体诱导产生愈伤组织，并使其大量增殖，再通过机械震荡或者酶解的方法使细胞分离从而获得游离的细胞。

一个克隆的细胞群体是从一个单一母细胞繁殖而来。分离单一细胞并使其繁殖为一细胞群体的方法成为细胞的克隆化。