精（液）斑中含有丰富的酸性磷酸酶可将磷酸苯二钠分解，产生萘酚。萘酚经铁氰化钾作用与氨基安替比林结合，产生红色醌类化合物。检材与试剂作用呈红色为阳性，表明检材含有酸性磷酸酶，可能是精斑；呈橙黄色或绿黄色为阴性，则不是精斑。由于酸性磷酸酶并非精液所特有的，其他体液、分泌液及脏器中也存在，只是含量少。因此，该试验只能作为精斑的预试验。本法灵敏度较高，操作简便。