（1）将缺乏维生素B₁₂。但含有过量其他营养物质的培养基分装于一系列试管，分别定量接入用于测定
的微生物；
（2）在这些试管中分别补加不同量的维生素B₁₂标准样品及待测样品，在适宜条件下培养；
（3）以微生物生长量（如测定OD_600nm）值对标准样品的量作图，获得标准曲线；
（4）测定含待测样品试管中微生物生长量，对照标准曲线，计算待测样品中维生素B₁₂的含量。