问答题X 纠错
(1)每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数称为效价。
(2)测定噬菌体效价方法有单层平板法和双层平板法,其中双层平板法是最常用的。
(3)操作步骤:先向平皿中倒入底层平板(2%琼脂培养基10mL),待凝固后倒入上层培养基(1%琼脂培养基5mL)、宿主菌悬液(对数期菌液0.2mL)和噬菌体试样(合适稀释液0.1mL)的混合溶液,凝固后放入37培养10h,计数噬菌斑并计算效价。
(4)原理:
1.在上层培养基中宿主细胞与相应噬菌体混合后,在菌苔上形成一个具有一定形状、大小、边缘和透明度噬菌斑。噬菌斑数量代表了病毒粒子数。
2.加了底层培养基后,可使原来底面不平的玻璃皿的缺陷得到了弥补;
3.所形成全部噬菌体斑都接近处于同一平面上,因此不仅每一噬菌斑的大小接近、边缘清晰,而且不致发生上下噬菌斑的重叠现象;
4.因上层培养基中琼脂较稀,故形成的噬菌斑较大,更有利于计数。
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