首选肝胆系统动态显像，先天性胆道闭锁表现为胆管严重梗阻，肠道内始终不见放射性出现，而任何原因引起的严重肝功能损害则表现为胆一肠通过时间明显延迟，甚至超过24小时。显像前口服苯巴比妥可以提高鉴别诊断的灵敏度，如果在显像24小时内肠道内出现放射性，说明是肝内病变引起，如果肠道内无放射性出现，则可以诊断为先天性胆道闭锁。