（1）电解质：常用生理盐水，促进可见现象的发生。
（2）温度：适宜的温度可增加抗原、抗体活性及相互接触的机会。
（3）pH：pH=6-8较合适；pH=5-5.5，非特异性沉淀；pH=2-3，解离。
（4）振荡：振荡加速反应；但过速可解离。
（5）杂质：蛋白质、脂质、糖类杂质时，抑制反应进行或引起非特异性反应。故试验设立对照。

活苗优点：使用剂量小，免疫产生快。缺点：毒力返强，冷冻保存。
灭活苗优点：方便安全，容易保存。缺点：免疫期短，使用剂量大。