①先调节水相的pH，调节pH的原则是：使蛋白质带电性与表面活性剂电性相反，即，当表面活性剂带正点时，调节pH使pH>pI；当表面活性剂带负点时，调节pH使pH〈pI。
②将油相加入到水相中，机械搅拌或者超声乳化，使蛋白质尽可能多的进入反胶团中；
③静置分层，上层为含有大量的包裹着蛋白质的反胶团的油相，下层为水相；
④将分层后的油相分离出来，并向其中加入少量的水相纯溶剂，搅拌破坏反胶团结构，使其中的蛋白质充分溶解于水相中；
⑤静置分层，上层为含有大量蛋白质的水相，下层为油相；
⑥分离出上层水相中的蛋白质。