实罐灭菌：将培养基置于发酵罐中用蒸汽加热，达到预定灭菌温度后，维持一定时间，再冷却到发酵温度，然后接种发酵，又称分批灭菌。
要保证分批灭菌的成功，必须有：
1.内部结构合理，焊缝及轴封装置可靠，蛇管无穿孔现象的发酵罐；
2.压力稳定的蒸汽；
3.合理的操作方法
灭菌时间的计算
例：有一发酵罐，内装培养基40m³，在121℃的温度下进行实罐灭菌。设每毫升培养基含有耐热菌的芽孢2×10⁷个，在121℃时的灭菌速率常数为0.0287s^-1。试求灭菌失败的机率为0.001所需的时间。

连续灭菌：指培养基连续加热、维持和冷却后进入发酵罐。
有以下优点：
（1）提高产量，设备利用率高。
（2）与分批灭菌比较，培养液受热时间短，培养基中营养成分破坏较少。
（3）产品质量较容易控制；蒸汽负荷均衡，操作方便。
（4）降低了劳动强度，适用于自动控制。
灭菌时间的计算
例：有一发酵罐，内装培养基40m³，在131℃的温度下进行连续灭菌。设每毫升培养基含有耐热菌的芽孢2×10⁷个，在131℃时的灭菌速率常数为0.25s^-1。试求灭菌失败的机率为0.001所需的时间。