在一定的条件下，假设金属离子M与络合剂R发生下列显色反应（略去离子电荷）： M+nR=MR_n
为了测定络和比n，可固定金属离子的浓度C_M，改变络和剂的浓度C_R，配置一系列C_R/C_M不同的显色溶液。在络和物的λ_max处，采用相同的比色皿测量各溶液的吸光度，并对C_R/C_M作图。在显色反应尚未进行完全阶段，此时C_R/C_MR的增加而上升。在显色反应进行完全时，溶液的吸光度基本保持不变，曲线的转折点E所对应的C_R/C_M=n。实际上在转折点附近，由于络和物多少有离解，故实测的吸光度要低一些。