载气只起到携带样品的作用，不能与样品组分，固定液起化学反应，同时也不能被固定液溶解或吸附。样品分子在载气中的扩散系数与载气分子量的平方根成正比。在分子量较轻的载气中样品分子容易扩散，使柱效降低，载气流速较低时，分子的扩散较显著，这时应采用分子量较大的气体作载气，如N₂，Ar等，当载气流速较快时，分子扩散不起主要作用，为提高分析速度，多采用分子量较小的H₂，He作载气。

在工业在线色谱仪运用中，影响色谱柱分离度的主要因素是：
（1）色谱柱长度。
（2）填料的性质。
（3）色谱柱温度。