问答题X 纠错
(1)核小体在细胞中存在的实验证据:
①用温和的方法裂解细胞核,将染色质铺展在电镜铜网上,通过电镜观察,未经处理的染色质自然结构为30nm的纤丝,经盐溶液处理后解聚的染色质呈现一系列核小体彼此连接的串珠状结构,串珠的直径为11nm。
②用非特异性微球菌核酸酶消化染色质时,发现绝大多数DNA被降解为大约200bp或其整数倍的片段。如果用同样方法处理裸露的DNA,则产生随机大小的片段群体。
③应用X射线衍射、中子散射和电镜三维重建技术,研究染色质结晶颗粒,发现核小体颗粒是直径为11nm、高6.0nm的扁圆柱体,具有二分对称性。
④SV40微小染色体分析。用SV40病毒感染细胞,病毒DNA进入细胞后,与宿主的组蛋白结合,形成串珠状微小染色体,电镜观察SV40的DNA为环状,周长1500nm,约5.0kb,若200bp相当于一个核小体,则可形成25个核小体,实际观察到23个,与推断基本一致。
(2)核小体的基本结构:
①每个核小体单位包括200bp左右的DNA超螺旋和一个组蛋白八聚体以及一个分子的组蛋白H1。
②组蛋白八聚体构成核小体的盘状核心颗粒,相对分子质量为100×103,由四个异二聚体构成,包括两个H2A·H2B和两个H3·H4。
③147bp的DNA分子超螺旋盘绕组蛋白八聚体1.75圈,组蛋白H1在核心颗粒外结合额外20bpDNA,锁住核小体DNA的进出端,起稳定核小体的作用。
④两个相邻的核小体之间以DNA相连,典型长度60bp,不同物种变化值为0~80bp不等。
⑤组蛋白和DNA之间的相互作用主要是结构性的,基本不依赖于核苷酸的特异序列。
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