问答题X 纠错

重组人红细胞生成素的分离纯化工艺过程。

参考答案：①重组人红细胞生成素的分离
（1）CM－Sephrose亲和层析柱预先用Na-HAc-异丙醇活化，并用20mmol/LTrisHCl平衡缓冲液平衡。
（2）收获培养基滤膜过滤后上CM亲和层析柱，平衡缓冲液平衡。
（3）0～2mol/LNaCl，20mmol/LTris洗脱液梯度洗脱。
（4）收集活性洗脱峰10mmol/LTris透析液透析过夜。
②重组人红细胞生成素的纯化
（1）透析后的活性组分上预先平衡的DEAE离子交换柱。
（2）0～1mol/LNaCl-Tris洗脱液梯度洗脱，收集活性洗脱峰。
（3）上10%乙腈平衡的RP-HPLC柱（C4填料），10%～70%的乙腈溶液梯度洗脱，收集活性洗脱峰。
（4）上凝胶柱（预先用20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡），20mmol/L柠檬酸盐缓冲液平衡并洗脱，收集活性洗脱峰（红细胞生成素）
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