离子交换层析的原理：样品中待分离的溶质离子，与固定相上所结合的离子交换，不同的溶质离子与离子交换剂上离子化的基团的亲和力和结合条件不同，洗脱液流过时，样品中的离子按结合力的弱强先后洗脱，达到分离的目的。 
蛋白质是由氨基酸聚合形成的聚合物，所以蛋白质也存在等电点（pI），蛋白质在溶液中带电状况同氨基酸相同，取决于所处溶液的pH 值。当pI<pH时，蛋白质带净负电荷；而当pI>pH时，蛋白质带净正电荷。阴离子交换剂本身带正电荷，阳离子交换剂本身带负电荷，因此蛋白质可以用阳离子交换剂或阴离子交换剂进行离子交换层析。

1.考马斯亮兰；
2.银染；
3.荧光染色；
4.负染。

1.复制起始点
2.选择性基因
3.强的、可诱导的启动子
4.强的转录终止序列
5.核糖体结合位点
6.合适的多克隆位点