乳糖发酵实验：将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1mL以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1mL及1mL以下者，用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管，置（36±1）℃温箱内，培养（24±2）h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠杆菌群阴性，如有产气者，进行分离培养。
证实试验：在分离培养平板上，挑去可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰染色，同时接种乳糖发酵管，置（36±1）℃温箱内培养（24±2）h，观察产气情况，反乳糖管产气、革兰氏为阴性的无芽孢杆菌，即可报告为大肠菌群阳性。
分离培养：将产气的发酵管分别转种在伊红美兰琼脂平板上，置（36±1）℃温箱中，培养18-24h，然后取出，观察菌落形态，并作革兰染色和证实试验。
靛基质试验：某些细菌，如大肠杆菌、变形杆菌等，能分解培养基内蛋白胨中的色氨酸，产生靛基质，再与试剂对二甲氨基苯甲醛作用后，形成红色的化合物—玫瑰靛基质。