原理：利用饱和蒸汽具有的强穿透能力，以及蒸汽在冷凝时放出的大量热能，使微生物细胞中的蛋白质、酶和核酸分子内部的化学键，特别是氢键受到破坏，引起不可逆的变性，造成微生物死亡。
方法一：0.11MPa（表压），121℃，保温20~30min
方法二：0.07MPa（表压），115℃，保温30min
使用范围：一般培养基、玻璃器皿、无菌水、缓冲液、金属用具等都可以采用此法灭菌。