参比溶液的作用是相当重要的。在实际测量中是以通过参比溶液的光强作为入射光强度，用来调节仪器零点，以消除吸收池池壁及溶剂等对入射光的反射和吸收带来的影响，使所测得的吸光度能够较真实地反映被测组分的浓度。参比溶液的选择原则是使测得的吸光度能真正反映被测物质的含量。参比溶液常考虑被测组分和显色剂对入射单色光的吸收情况来选择：
（1）溶剂空白：只有显色剂与被测组分反应的生成物有吸收，被测组分、显色剂及其它试剂均无吸收，可以用纯溶剂作参比溶液。
（2）试剂空白：被测组分有吸收，显色剂及其它试剂略有吸收，用不含被测组分的试剂溶液作参比溶液。如试样溶液中的干扰成分与显色剂也发生反应，生成物在所选择的入射单色光波长处也有吸收，可选择合适的掩蔽剂将被测组分掩蔽后再加显色剂和其它试剂的溶液作参比溶液。
（3）试样参比：显色剂及其它试剂均无吸收，被测组分略有吸收，用不含显色剂及其它试剂等试剂的试样溶液作参比溶液。